Orum Therapeutics
Orum Therapeutics (Orum)近日刚完成3000万美元的B轮融资以推进特异性细胞穿透抗体平台Oromab的开发工作，Oromab平台开发的抗体主要针对细胞溶质蛋白，包括一些“不可成药” (undruggable)的靶点，此轮融资还将用于扩大Orum在韩国和波士顿的研发实验室。
靶向细胞膜内靶点是未来抗体药的主要方向之一，通过受体介导的内吞作用是抗体穿膜的途径之一，不过技术难点在于，常规抗体容易进入溶酶体被降解或进入细胞核内，无法到达细胞质中发挥作用。
使用Oromab平台，Orum构建细胞穿透抗体，其结合细胞特异性受体，并通过受体介导的内吞作用内化。利用Orum的专有设计，这些抗体不会到达溶酶体，而是从早期内体逃逸到胞质中，一旦进入胞质中，抗体就可以发挥治疗作用，直接靶向引起疾病的蛋白质或递送有效载荷。
通过Oromab平台，Orum正在探索几种治疗途径，通过内部开发或者与外部合作的方式：
a)抑制Ras和肿瘤特异性细胞内致癌驱动因子
b)用于癌症或罕见病的寡核苷酸或酶的递送
c)疾病蛋白的靶向降解
Oromab平台技术
Oromab平台是基于Ajou Univ Yong-Sung Kim博士围绕m3D8抗体的开创性研究工作。Yong-Sung Kim博士于2016年共同创立了Orum Therapeutics，他曾经在Genentech工作过一年的时间。
Oromab是一种全长IgG抗体，具有独特的细胞膜穿透性VL，来自于一种抗DNA抗体m3D8的VL结构域。
这种独特的VL能够与细胞表面带负电荷的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖 (heparan sulfate proteoglycan，HSPG)通过静电相互作用内吞进入细胞内。在早期内体的弱酸性条件下，活化的heparanase切割降解HSPG并使抗体游离，随后将Oromab转运至胞质中而不被降解。
发明人改进了具有细胞穿透能力的轻链可变单结构域(VL)抗体片段使其易与多种人重链可变区 (VH)相互作用，此外，发明人筛选VH文库以选择靶向活化RAS的VH并构建抗RAS细胞穿透抗体，其穿透细胞定位在细胞溶胶中且与细胞质中的活化RAS特异性结合。
基于这些发现，Orum于2015年7月递交了PCT国际申请PCT/KR2015/007626，涉及一种细胞穿透抗体，包含具有细胞穿透能力的轻链可变区 (VL)。PCT/KR2015/007626进入了US/EP/JP/KR等国家或地域。
PCT/KR2015/007626进入美国国家阶段的申请公开号为US20170218084A1，其独立权利要求分别涉及一种将抗体定位在细胞溶胶中的方法、轻链可变区、使用细胞穿透抗体诊断或治疗疾病的方法等。
部分实施例涉及到使用穿透细胞的VL替换对阿达木单抗和贝伐单抗的VL获得cytotransmab，证明其具有穿透细胞的能力。
“45 A method of localizing an intact immunoglobulin-type antibody in the cytosol of a cell comprising:
contacting the cell with an intact immunoglobulin-type antibody whereby said antibody penetrates the membrane of the cell and localizes in the cell’s cytosol,
wherein the antibody comprises a light-chain variable region (VL) that penetrates the cell membrane comprising:
a CDR1 comprising an amino acid sequence having at least 90% homology with an amino acid sequence as set forth in SEQ ID No: 4; and
a CDR3 comprising an amino acid sequence having at least 90% homology with an amino acid sequence selected from the group consisting of SEQ ID Nos: 6 and 12.”
PCT/KR2015/007626进入中国国家阶段的申请CN107001481A正处于审查阶段，权利要求1涉及一种将抗体定位在细胞溶胶中的方法。其它独立权利要求还分别涉及一种诱导抗体定位在细胞溶胶中的轻链可变区、包含特定轻链可变区的抗体、与细胞穿透抗体融合而成的生物活性分子、药物组合物或产生细胞穿透抗体的方法等。
2017年，Orum递交了另一个涉及细胞溶质穿透抗体的PCT/KR2017/005559，同族中国专利申请CN109790212A的权利要求1涉及一种细胞溶质穿透抗体或其抗原结合片段，包含轻链可变区和/或重链可变区，并限定了轻链可变区和/或重链可变区CDR3的序列通式。
PCT/KR2017/005559侧重保护细胞溶质穿透抗体可变区上的一些重要氨基酸位点，其范围与PCT/KR2015/007626有所区别。
靶向RAS蛋白的细胞穿透抗体
Ras蛋白是小GTP酶，在细胞增殖和存活中起重要作用。在许多癌症中，RAS基因中的致癌突变导致过度活跃的Ras蛋白，其可导致异常的细胞增殖和癌症。
Ras蛋白缺乏用于高亲和力结合的口袋，通常认为是不可成药的，Orum使用Oromab技术开发了靶向细胞内活化Ras突变体的抗体。
2015年7月起递交的PCT/KR2015/007627家族涉及靶向活化Ras的抗体。
PCT/KR2015/007627在中国国家阶段的在审专利为CN106999575A，独立权利要求分别涉及：抑制细胞内活化的RAS的方法、结合细胞质中活化RAS的VH、使用靶向RAS抗体抑制肿瘤生中的方法、或筛选结合细胞溶胶中RAS重链可变区的方法等。
期待“不可成药靶点”有所突破
Oromab平台技术使用具有细胞膜穿透能力的轻链可变单结构域(VL)抗体片段，对其进行修饰，使之易与多种人重链可变区(VH)相互作用并构建细胞穿透抗体，这些抗体能够定位于细胞质而不被溶酶体降解或进入细胞核中。
基于Oromab平台开发的抗体主要针对当前小分子或抗体药来说“不可成药”的靶点，我们期待未来靶向这类靶点的抗体能够有新的突破。
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