抗肿瘤疫苗—普列威

在Provenge^®获批以前，前列腺癌的治疗通常采用放化疗或激素疗法，这些治疗方法通常没有选择性，容易产生耐药性，复发率较高，而免疫疗法是利用患者自身的免疫系统来选择性地杀伤肿瘤，从而降低副作用。先前的一项临床三期试验结果显示，相比于安慰剂，sipuleucel-T将激素难治性晚期前列腺癌患者的总生存期提高了4.1个月。最近的一项研究结果发现，被Provenge^®激活的免疫细胞还具有长期记忆力，也就意味着其可以发挥长期的治疗效果。

2010年，基于三项双盲随机三期临床试验，FDA批准Provenge^®用于治疗激素难治性晚期前列腺癌，成为第一款治疗实体瘤的细胞免疫疗法。

Provenge^®由包含抗原呈递细胞 (Antigen presenting cells，APCs)的自体外周血单核细胞 (Peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)组成，自体外周血单核细胞在体外被一种重组融合蛋白 (PA2024)活化。PA2024是由前列腺酸性磷酸酶 (PAP，一种前列腺癌抗原，在大约95%的前列腺癌中表达)的羧基端与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF，一种免疫细胞激活剂)的氨基端融合而成，即为PAP-GM-CSF。APCs可以捕获PAP并将其加工为可以被T细胞识别的形式。

与CAR-T类似，Provenge^®需要对患者的自体细胞进行分离并在离体 (ex vivo)条件下进行活化，然后回输至患者体内，制备过程如下：

步骤1，在输注前约3天，通过标准的白细胞分离术分离并富集患者的PBMCs；

步骤2，离体条件下使用重组融合蛋白 (PA2024)培养PBMCs，洗涤并配置为制剂。

步骤3，产品运输至门诊中心并回输至患者体内。

Provenge^®的细胞组成取决于细胞分离术获得的细胞组成，除了APCs之外，最终产品还包含T细胞、B细胞、自然杀伤细胞和其它细胞。单个剂量的Provenge^®含有至少5000万个经过PAP-GM-CSF活化的CD54⁺抗原呈递细胞，分散在250 mL的乳酸林格氏溶液 (Lactated Ringer’s Injection)中。

回输至患者体内的Provenge^®可以活化CD4⁺和CD8⁺ T细胞，从而对前列腺癌细胞发挥杀伤作用。

Provenge^®最初由Dendreon (丹瑞)公司开发，2015年，Valeant Pharmaceuticals收购了Dendreon的所有资产。而2017年，中国的三胞集团以8.19亿美元又从Valeant收购了Dendreon，这其中包括Provenge^®及其完整知识产权。这意味着中国在细胞免疫疗法方面迈出了重要一步，那与抗体类生物药相比，细胞免疫治疗类产品的专利保护和生产技术有何特点呢？

保护Sipuleucel-T的专利

保护活性成分的专利

同抗体类药品专利保护类似的是，发挥免疫刺激作用的活性成分专利同样是保护细胞治疗产品最重要的一类专利。对于Provenge^®这一产品来说，活性成分相关的专利主要包括保护PAP-GM-CSF以及活化后的APCs的专利。

US6121044A保护一种细胞组合物，权利要求1请求保护：

“A cell composition comprising potent antigen presenting (PAP) cells, prepared by obtaining from a human blood sample, a monocyte-depleted cell fraction containing peripheral blood lymphocytes and dendritic-precursor cells, culturing…,harvesting…, and entrapping said PAP-enriched fraction in a three-dimensional matrix; said cell composition characterized by (i) a phenotype that is positive for surface antigen HLA DR and negative for surface antigens CD3, CD14, CD16, and CD20, (ii)…”

US6121044A限定了细胞组合物的制备方法以及细胞组合物本身的性质，已经于2015年到期。

US5976546A保护用来培养APCs的多肽缀合物多聚体，每个多肽缀合物亚基包含PAP和GM-CSF。US5976546A的延续案US6210662B1保护包含活化APCs的治疗组合物，所述APCs在体外通过暴露于US5976546A中涉及的多肽缀合物多聚体进行活化。这两个专利也已经于2015年到期。

US7414108B2则保护PAP多肽，并限定了PAP多肽的具体序列，将于2019年到期。US8361479B2及其延续案US8647865B2分别保护PAP-GM-CSF的多肽以及编码相应多肽的核苷酸，分别将于2031年和2027年到期。

保护治疗方法或治疗用途的专利

US6080409A保护诱导T细胞免疫应答的方法，权利要求1保护：

“A method of inducing a T cell-mediated cellular immune response to a soluble peptide antigen in a mammalian subject,

comprising isolating antigen presenting cells (APCs) from the subject;

exposing said APCs in vitro to a conjugate of granulocyte macrophage stimulating factor (GM-CSF) covalently linked to the soluble peptide antigen under conditions effective to activate the responder proliferation activity of the APCs;

as evidenced by the ability of said APCs to stimulate proliferation of responder cells in vitro;

administering said activated APCs to the subject.”

US6080409A涉及将APCs分离活化并回输至患者体内的整个过程，已经于2015年到期。

US7597894B2保护一种抑制表达人PAP的肿瘤细胞增殖的方法，同样以APCs分离活化并回输至患者体内的整个过程对该方法进行限定，将至2027年到期。

US8153120B2保护治疗癌症的方法，除了保护从PBMC细胞分离活化并施用的过程，还涉及对受试者的治疗反应进行评估的方法。US8153120B2并未对与GM-CSF连接的抗原进行限定，也就是说除了PAP抗原之外，还涵盖其它抗原种类，将至2029年到期。

与抗体类药品的相关专利有所不同的是，细胞治疗产品的治疗方法/用途专利更强调从产品的制备过程进行保护，可见产品的制备过程对于细胞治疗产品来说至关重要。

其它专利类型

其它专利类型还包括保护细胞分离方法、细胞分离装置、APCs活性鉴定方法等涉及产品制备不同环节的专利以及保护疗效预测/监测方法等涉及治疗过程的专利。

可见，抗体类产品和细胞治疗类产品的专利保护既有相同之处，比如：都注重活性成分的保护；也有不同之处，比如：后者更强调对产品的制备过程和各个制备环节的保护。

这是因为与抗体类产品相比，细胞治疗类产品的生产技术壁垒更高。细胞治疗产品通常利用患者自身的细胞进行生产，因此对于质控和生产工艺的要求更加苛刻。不过，Dendreon被三胞收购后，意味着Provenge^®这一新型免疫疗法将更快进入中国市场，据报道，Provenge^®预计将于明年年初开始进行临床试验，并计划于2020年底在中国内地上市。

中国有望赶上细胞免疫疗法的浪潮

作为已经上市7年之久的的Provenge^®，Dendreon建立起了全球首个针对细胞免疫治疗产品的工厂和管理系统，也为后续的细胞治疗产品的生产提供了范例，据悉，FDA批准的第一个CAR-T产品Kymriah^®的生产工厂正是由Dendreon出售给诺华的。三胞集团收购Dendreon之后，已经在香港和上海张江建设工厂，并将这一先进的生产技术和流程引入中国，这不仅意味着Provenge^®有望早日造福中国患者，还可以推进中国在细胞免疫治疗领域的产业化进程以及相应监管体系的完善。鉴于中国在CAR-T领域的研发进度处于全球领先地位，引进Provenge^®也为CAR-T在中国的产业化铺平了道路。

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